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Clonage du gène polA sauvage de Escherichia coli K-12 dans un vecteur multicopie

SN

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Sara Nagy-Gyorgy Parduez

Résumé du colloque

Nous avons utilisé la méthode de transmidation pour cloner le gène polA sauvage dans un transmidé pRRA101. Le transmidé est un plasmide-hybride (mini-Mu cI(1), pSC101), pendant la transmidation la partie de pSC101 est éliminée et substituée avec le gène cloné ainsi le transmidé devient pleinement autonome. Nous avons obtenu un transmidé, la carte de restriction prouve que le transmidé est mutant parce qu'il y a une délétion dans la partie de mini-Mu. La sélection montre que le gène polA sauvage n'a pas été exprimé. La digestion par des enzymes de restrictions EcoRI et PstI donne une bande 4.2 Kb qui contient le gène cloné. La carte de restriction du gène cloné prouve que cette séquence code pour la DNA polymérase I, mais il manque le promoteur de ce gène.

Contexte

news icon Thème du colloque :
Biologie moléculaire
host icon Hôte : Université de Moncton

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Titre du colloque :

Biologie moléculaire

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