Clonage d'un gène d'autolysine de Streptococcus faecalis ayant une activité anti-Clavibacter michiganense pv. sepedonicum dans un vecteur binaire et production de plants de tabac transgéniques
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Résumé du colloque
Nous avons cloné dans E. coli et séquencé une autolysine de S. faecalis. Le produit de ce gène, une protéine de 74 kDa, possède une activité hydrolytique active contre les parois de Micrococcus lysodeikticus et de C. michiganense pv. sepedonicum, un pathogène responsable du flétrissement bactérien de la pomme de terre. La région codante de 2013 nt a été placée sous le contrôle du promoteur CaMV35S dans un vecteur binaire de la série pBI afin de produire le clone pBI2000. Pour ce faire, il a fallu créer de nouveaux sites de restriction de chaque côté du gène par mutagénèse in vitro et remplacer le gène délateur GUS par le gène d'autolysine. La transformation du tabac s'est faite via l'infection de feuilles par Agrobacterium tumefaciens transformé avec le clone pBI2000. L'analyse des transformants sera aussi discutée.
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