Colloque

Clonage et caractérisation des recombinases XerC et XerD de Proteus mirabilis

Manuela Villion

George Szatmari

Membre a labase

Manuela Villion

Résumé du colloque

Le système de recombinaison à spécificité de site Xer sert à la maintenance des réplicons (chromosome et certains plasmides) chez Escherichia coli et d'autres bactéries. Il permet la conversion des multimères en monomères. Pour ce faire, il nécessite deux recombinases, XerC et XerD, qui font partie de la famille des intégrases du phage lambda, et un site sur lequel elles agissent (site dif chromosomal ou site cer de ColE1). Cependant, pour la résolution des multimères plasmidiques, la présence de facteurs accessoires est également requise: ArgR et PepA. La présence de ces recombinases avait été détectée chez plusieurs Enterobacteriaceae dans le laboratoire. Les techniques de PCR avec des amorces dégénérées et de PCR inverse ont permis de cloner et de séquencer les gènes xerC et xerD de Proteus mirabilis. Ces gènes montrent une très grande similarité avec xerC et xerD d'E.coli et de Salmonella typhimurium. Ils sont de plus capables de complémenter une souche d'E.coli mutante pour les deux gènes. Des études d'expression et de retardement sur gel ont également été effectuées avec XerD et sont en cours pour XerC.