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Clonage et régulation de l'expression du gène phs (Production d'Hydrogène Sulfure) chez Salmonella typhimurium

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Nezha Alami

Résumé du colloque

Le gène phs est nécessaire pour la production du H2S à partir de la réduction du thiosulfate via une thiosulfate réductase. La régulation de l'expression du phs n'est pas encore bien élucidée. L'anaérobiose est nécessaire pour exprimer phs, il est réprimé par le glucose et le nitrate, et n'est pas sous le contrôle des gènes régulateurs du métabolisme anaérobie (oxrA, oxrB ...). Des mutants spontanés capables d'exprimer la β-galactosidase en aérobiose, à partir d'une souche qui porte la fusion phs:: Mud 1(Ap r lac) sont utilisés. Les résultats indiquent que les mutations sont dans ou à proximité du promoteur du phs. De plus, les analyses des souches mérédiploïdes ont mis en évidence un facteur de régulation en "trans". En séquençant le gène et son promoteur, nous pourrons identifier la nature de la mutation qui permet d'exprimer le gène de fusion en aérobiose. À partir d'une banque génomique de Salmonella typhimurium dans le vecteur pBR 328, un clone ayant un insert BamHI de 12Kb a été isolé après ciblage sur milieu indicateur.

Contexte

news icon Thème du colloque :
Biologie moléculaire
host icon Hôte : Université de Sherbrooke

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Titre du colloque :

Biologie moléculaire

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