Colloque

Clonage et séquençage du gène codant pour la lipoprotéine I de Pseudomonas aeruginosa sérotype 1

Alain St-Onge

Roland Brousseau

Pierre Lebel

Françoise Romeyer

Luke Masson

Membre a labase

Alain St-Onge

Résumé du colloque

Pour développer une sonde d'ADN spécifique pour le P. aeruginosa, on a construit une librairie génomique de la souche PAO1 dans E.coli. Le criblage des clones a été fait par immunoréaction avec des sérum de patients atteints de fibrose kystique, montrant un titre élevé d'anticorps contre les protéines de la membrane externe de P. aeruginosa. Les clones immunoréactifs possédaient un fragment de 23 kb et exprimaient une protéine de poids moléculaire comparable à celui de la lipoprotéine I (10kDa). Cette protéine exprimée s'est avérée sensible aux protéases, associée aux membranes et est particulièrement antigénique. Un fragment IS1 de 2.3 kb a été cloné dans M13mp19 et utilisé comme l'aire d'amorces tirées de la séquence publiée du gène de la lipoprotéine I de P. aeruginosa sérotype 5. La séquence de la région codante a montré une homologie avec la séquence de la lipoprotéine I de P. aeruginosa sérotype 1 et 6. Cependant on note deux mutations mineures au niveau des régions codantes et une mutation silencieuse dans la région séquence (codon 65). Il n'a pas semblé y avoir de substitutions dans les séquences promotrices entre les différents sérotypes de P. aeruginosa contrairement aux LPS. Cette séquence est actuellement évaluée pour l'identification des espèces de la famille des Pseudomonas et des souches de P. aeruginosa.

Contexte

Section :

Biologie moléculaire

Thème du colloque :

Biologie moléculaire

Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

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