Colloque

Clonage moléculaire du cDNA de souris codant pour l'oscilline et analyse de l'expression de son ARNm par RT-PCR

Pascal Amireault

François Dubé

Membre a labase

Pascal Amireault

Résumé du colloque

Le mécanisme d’activation des ovocytes lors de la fécondation chez les mammifères est mal connu. L’une des hypothèses est que l’augmentation du Ca2+ intracellulaire des ovocytes serait induite via l’injection par le spermatozoïde d’une protéine activatrice, «l’oscilline», récemment caractérisée chez le hamster doré. Notre objectif est de vérifier l’universalité de la distribution et des fonctions de l’oscilline, en utilisant la souris comme modèle expérimental. Basé sur la séquence connue de l’oscilline de hamster et de séquences apparentées chez l’humain et E.coli, des oligonucléotides dégénérés nous ont permis, par RT-PCR en utilisant des ARNm de testicules de souris, d’obtenir un fragment PCR murin (OSC-2), de la taille attendue (779 nuc.), représentant 90% de la séquence complète présumée. La séquence protéique déduite d’OSC-2 (259 a.a.) est similaire à celles des oscillines de hamster et humaine (96% et 95.5 %), démontrant qu’il s’agit bien de l’homologue murin. Des analyses d’expression, par RT-PCR,de l’ARNm murin d’oscilline, nous indiquent qu’il est exprimé non seulement dans le testicule, mais aussi dans le coeur, le foie, le poumon, le rein et l’utérus, alors qu’il ne l’est pas dans la rate. Nous souhaitons procéder à la caractérisation moléculaire complète de l’oscilline de souris, et à l’analyse de l’expression de son ARNm au cours du développement embryonnaire. Notre étude devrait permettre, à plus long terme, de clarifier les fonctions potentielles de l’oscilline, et de déterminer l’universalité de celles-ci.

Contexte

Section :

Reproduction

Thème du colloque :

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Hôte : Université Laval

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