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Résumé du colloque
L'ultracentrifugation directe (culot) de milieu de culture comme procédé rapide de concentration virale ne s'applique guère au VSRH, des pertes d'infectivité de 99% ayant déjà été rapportées. La très grande fragilité du virus nécessite donc l'emploi de méthodes plus douces. Conséquemment, nous avons contrôlé le VSRH par emploi de polyéthylène glycol (PEG) ou de sulphate d'ammonium (SA) ainsi que par l'ultrafiltration sur fibres creuses. Les deux premières approches permettent une récupération virale similaire (50%) mais inférieure à l'ultrafiltration (75%). L'agrégation virale par le PEG ou SA serait responsable du faible recouvrement observé avec ces méthodes. On note de plus que le contenu protéinique des précipités obtenus par l'emploi du PEG s'avère nettement inférieur aux deux autres approches. L'intégrité morphologique des virus a été notée dans le cas des trois approches par microscopie électronique. De plus, il nous a été possible de partiellement purifier, par un facteur d'environ 1 000 (PFU/mg), les virus précipités au PEG suivant deux cycles de centrifugation sur saccharose.
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