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Résumé du colloque
Les méthodes de séparation telles que l'électrophorèse et la chromatographie ont été utilisées depuis plusieurs années pour l'étude des interactions ligands-protéines. L'énantiosélectivité de la liaison de ligands chiraux est révélée par une séparation chirale quand les interactions ligands-protéines sont étudiées par les techniques chromatographiques. Cependant, ces interactions sont considérablement affectées par les conditions expérimentales. Chaque technique expérimentale impose certaines modifications particulières aux protéines ou aux ligands, par exemple l'immobilisation sur un support chromatographique, ce qui peut affecter les résultats. L'albumine sérique humaine (HSA) a été utilisée en HPLC et en électrophorèse capillaire (CE) pour produire des séparations chirales et étudier les liaisons protéine-ligand. La HSA immobilisée peut avoir des propriétés différentes de la protéine non-immobilisée. De plus le support chromatographique peut être responsable d'une rétention non-spécifique. Dans ce projet, nous avons étudié la capacité de la HSA à agir comme sélecteur chiral premièrement, en Ce en tant qu'additif en solution dans le tampon et deuxièmement, immobilisée sur des silices de 3 um en HPLC et en électrochromatographie capillaire (CEC). Nos résultats suggèrent que les effets des modificateurs organiques sur la rétention sont similaires en HPLC et CE, et que la liaison des ligands cationiques au support de silice en HPLC masque l'énantiosélectivité avec la protéine alors que cette interaction est aisément observée en CE.
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