Communication

Complexité des signaux contrôlant un frameshift programmé -1 essentiel à la prolifération du VIH

Dominic Dulude

Martin Baril

Lea Brakier-Gingras

Guy Lemay

Membre a labase

Dominic Dulude

Résumé de la communication

La synthèse de la protéine Gag-Pol, le précurseur des activités enzymatiques du virus VIH, requiert un déphasage (frameshift) programmé de type –1 du cadre de lecture lors de la traduction de l’ARN messager viral par les ribosomes des cellules infectées. Ce frameshift se produit au niveau d’une séquence glissante (U UUU UUA) suivie en 3’ d’une séquence stimulatrice en tige-boucle. Nous avons voulu déterminer si la région suivant la tige-boucle pouvait également influencer le frameshift. Nous avons introduit la région de frameshift du VIH incluant la séquence glissante, la tige-boucle et la portion adjacente à cette tige-boucle, au début de la séquence codante d’un gène rapporteur approprié codant pour la luciférase et contenu dans un vecteur d’expression eucaryote de type pcDNA3.1. L’insertion était telle que seuls les ribosomes effectuant un frameshift –1 pouvaient produire la luciférase. Nous avons créé une série de mutations, dans la séquence glissante, la tige-boucle ou la portion adjacente. L’activité du gène rapporteur contenant les diverses mutations a été évaluée in vitro, par transcription du messager correspondant et traduction dans un lysat de réticulocytes de lapin. Elle a aussi été évaluée dans des cellules en culture (COS) transfectées avec les vecteurs mutants. L’ensemble des résultats suggère que les signaux régissant le frameshift ne se limitent pas à la séquence glissante et la tige boucle et qu’un système complexe de contrôle assure que l’intensité du frameshift ne dépasse pas une valeur qui pourrait être toxique pour le virus.

Contexte

Section :

Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire

Domaine de la communication :

Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire

Hôte : Université de Montréal

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Thème du communication :

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