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Concentration et purification du "Channel Catfish Virus" (un virus de type Herpès)

JR

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J. Robin

Résumé du colloque

Les virus de type Herpès, à cause de leur fragilité et de leur tendance à l'agrégation, sont très difficiles à obtenir purs et biologiquement actifs. Les méthodes de purification connues ne permettent d'obtenir que des virions incomplets, insuffisamment débarrassés des contaminants d'origine cellulaire et ayant perdu leur pouvoir infectieux. Nous avons mis au point une méthode (précipitation au PEG 6,000 suivie d'une centrifugation isopycnique en gradient de métrizamide) grâce à laquelle le virus CCV a pu être concentré et hautement purifié (le DNA et les protéines cellulaires associés aux virions sont respectivement diminués par des facteurs de 1,000 et 2,000 xs). L'examen au microscope électronique des populations virales démontre la présence de virions intacts débarrassés de contaminants d'origine cellulaire. Toutefois, la perte de pouvoir infectieux est de 80 à 90%. Cette technique devrait s'avérer très utile pour les études qui nécessitent l'obtention de virions Herpès hautement purifiés.

Contexte

host icon Hôte : Université d'Ottawa

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