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Résumé du colloque
Il existe plusieurs techniques pour purifier le virus influenza, mais aucune d'elles ne s'avère universelle pour toutes les souches. Nous décrivons une technique simple, économique et qui permet la concentration et la purification du virus influenza en utilisant une technique angulaire. Dans un premier temps, la suspension virale brute est concentrée sur un gradient discontinu de saccharose (22% déposé sur un coussin de 50% congelé de façon successive). Après ultracentrifugation (tête 30 Beckman), le virus se retrouve à l'interface des deux couches de saccharose. Nous rejetons tout le liquide au-dessus du gradient. Les gradients sont congelés de nouveau et on ajoute sur ceux-ci une nouvelle quantité de suspension virale brute. Ces étapes sont répétées autant de fois qu'il est nécessaire pour concentrer notre lot de virus. Par cette méthode, 4 litres peuvent être concentrés en une journée. Les gradients sont récoltés et la purification est complétée par un gradient continu de saccharose modifié. Cette technique s'est avérée efficace pour plusieurs souches virales. De plus, dans le produit final, le virus est exempt de toute contamination par la cellule hôte.
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