Construction d'un virus hybride adéno-polyome produisant l'antigène grand T du virus du polyome sous le contrôle du promoteur tardif majeur du virus de l'adéno
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Résumé du colloque
En utilisant des techniques d'ADN recombinant, nous avons construit un virus hybride adéno-polyome dans lequel la région précoce du virus du polyome, dépourvue de son propre promoteur, a été liée au promoteur tardif majeur du virus de l'adéno. Le segment d'ADN du virus du polyome utilisé provenait d'un mutant ayant une délétion de 7 paires de bases exclusives aux séquences qui codent pour les antigènes petit et moyen T. L'effet attendu de ces insertions dans l'introïde l'antigène grand T, telle sorte que l'antigène grand T, produit par ce mutant, est une version délétée de l'antigène grand T de type sauvage. La séquence du virus du polyome liée au promoteur tardif majeur du virus de l'adéno a été insérée en bloc dans la région E1 du vecteur d'expression dérivé du virus de l'adéno de type 5 nommé 465A1/439. Cette séquence d'insertion fonctionne comme une unité transcriptionnelle indépendante utilisant le promoteur tardif du virus de l'adéno pour diriger l'expression d'épisomes et de polyadénylation du virus du polyome. Dans les cellules humaines de la lignée 293, le virus hybride dirige la synthèse d'environ 5 fois plus d'antigène grand T que le virus du polyome dans les cellules 3T6.
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