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Contrôle de l'expression génique au niveau post-transcriptionnel: la dégradation rapide des ARN messagers via les séquences 3' AU-riches est couplée à leur traduction

Éric Winstall
Vincent Raymond
Marie Gamache
ÉW

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Éric Winstall

Résumé du colloque

La régulation de la stabilité des ARN messagers (ARNm) constitue un important mécanisme de contrôle de l'expression des gènes. Ainsi, plusieurs ARNm de brève demi-vie contiennent une région 3' non codante (3' NC) des séquences AU-riches et motif AUUUA en répétition plus ou moins nombreuses. Ces séquences confèrent à l'ARNm une déstabilisation rapide de ces ARNm. Pour établir si la dégradation des ARNm contenant des séquences AU-riches est couplée à leur traduction, nous avons développé un modèle utilisant le LIFR (leukemia inhibitory factor receptor) et le GM-CSF (granulocyte macrophage-colony stimulating factor). Les séquences LIFR et le déstabilisateur de 5' non codée de GM-CSF furent insérées en 3' de la région codante de la luciférase. Les constructions furent transfectées dans les cellules fibroblastes embryonnaires de souris NIH 3T3. Un chasseur de leur (la désintégration de 100μM) est ensuite ajouté en milieu de culture pour déterminer la stabilité de l'ARNm. Dans ces cellules, nous avons démontré que la présence de séquences AU-riches en 3' NC de la luciférase augmente la dégradation de l'ARNm étudié. Les résultats obtenus indiquent que l'instabilité des ARNm contenant des séquences AU-riches est couplée à la traduction. L'addition d'actinomycine D, un inhibiteur de l'ARN polymérase II, a démontré que la traduction de l'ARNm contenant des séquences AU-riches est nécessaire pour leur dégradation. Nos résultats indiquent que l'instabilité des ARNm contenant des séquences AU-riches est couplée à leur traduction et suggèrent que l'ARNm de ces gènes est dégradé dans le cytoplasme par des mécanismes de surveillance associés aux ribosomes.

Contexte

Section :
Biochimie, biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biochimie, biologie moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Rimouski

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Titre du colloque :

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