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Coopérativité fonctionnelle entre les membres des familles de facteurs de transcriptions Ets et STAT dans la régulation de la transcription du gène encodant la molécule d'adhérence

Carle Dargis
Yvan De Launoit
Marie Audette
Nathalie Fugère
CD

Membre a labase

Carle Dargis

Résumé du colloque

La molécule d'adhésion intercellulaire ICAM-1 joue un rôle majeur dans la réponse immunitaire. Induite sur les cellules cibles par une grande variété de cytokines proinflammatoires, elle est un récepteur des B2-intégrines LFA-1 et Mac-1, exprimées sur les leucocytes et les monocytes. L'interaction ICAM-1/B2 intégrines est requise à l'optimisation des réponses tant cytotoxiques qu'humorales. L'expression d'ICAM-1 est régulée principalement au niveau transcriptionnel. La partie régulatrice située en 5' de la région codante du gène contient plusieurs éléments cis-actifs responsables du maintient des niveaux d'expression constitutifs d'ICAM-1, ainsi que de la stimulation de la transcription par les cytokines. Nous avons récemment démontré que certains membres de la famille des facteurs de transcription Ets contribuent à l'expression constitutive d'ICAM-1. Notre objectif a été de vérifier si les membres Ets sont également impliqués dans la réponse transcriptionnelle du gène aux cytokines. Le promoteur d'ICAM-1 cloné en amont du gène rapporteur de la luciférase, et différents mutants de délétion ont été transfectés transitoirement dans les cellules 293T (rein embryonnaire humain). Nous avons confirmé que la mutation du site Ets localisé en position -158 relativement à l'ATG diminue de 50% l'activité transcriptionnelle du promoteur d'ICAM-1, alors que la mutation d'un site à faible affinité en position -138 résulte en des effets marginaux. De plus, nous avons démontré que la mutation en position -158 affecte la réponse à l'interféron-y (IFN-y). En effet, la transcription d'ICAM-1 est stimulée par l'IFN-y via l'activation de STAT-1 et sa liaison au sire IRE d'ICAM-1 en position -116. L'activité transcriptionnelle du plasmide pGLE (promoteur non muté) est stimulée de 3.5 fois par l'IFN-y (100U/ml), alors que le plasmide muté en position -158, mais dont le site IRE est intact est stimulé de 1.5 fois seulement. Le mutant en position -138 répond de façon similaire au plasmide pGLE. De façon à augmenter l'amplitude de la réponse à l'IFN-y, les cellules ont été traitées à l'IFN-y en présence d'un dérivé du pervanadate, le pV (PIC), un inhibiteur des activités tyrosine-phosphatases. La combinaison IFN/pV (PIC) stimule de 17 fois l'activité transcriptionnelle du plasmide pGLE, alors que le mutant en position -158 est stimulé de 6 fois seulement. Ces résultats démontrent que le site Ets localisé en position -158 contribue d'optimiser les effets de STAT-1 sur la transcription d'ICAM-1 lors de la réponse inflammatoire à l'IFN-y.

Contexte

Section :
Biologie et génétique moléculaires
news icon Thème du colloque :
Biologie et génétique moléculaires
manager icon Responsables :
Louis Bernatchez
host icon Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

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