Colloque

Culture de cellules endométriales pour l'étude de la physiopathologie de l'endométriose

A. Akoum

J. Bergeron

M. Villeneuve

A. Lemay

R. Maheux

Membre a labase

A. Akoum

Résumé du colloque

L'histogenèse de l'endométriose semble être liée à une implantation et une croissance de cellules endométriales à l'extérieur de la cavité utérine sous l'influence de facteurs divers (hormones, facteurs de croissance, cytokines...). L'objectif du présent travail est d'établir un modèle de culture in vitro permettant d'analyser les fonctions des cellules endométriosiques par comparaison à celles des cellules endométriales trifinies afin de mieux comprendre la physiopathologie de l'endométriose. Des biopsies d'endomètre (n=10) et d'endométriose ovarienne (n=3) ont été obtenues stérilement lors de laparoscopie/laparotomie réalisées pour stérilisation tubaire, pour infertilité ou hystérectomie. Après dissociation à l'aide de collagénase, les cellules stromales dissociées ont été mises en culture dans du DMEM-F12 contenant 10% de FBS et 5 µg/ml d'insuline. L'épithélium glandulaire purifié par sédimentation fut cultivé sur des filtres de polycarbonate enduits d'une matrice collagénique, dans du MEM-D, valiné contenant 1% d'un supplément hormonale et 10 ng/ml d'EGF. Ces conditions de culture semblent favoriser la croissance de cellules épithéliales. En effet, les préparations de cellules épithéliales, examinées par immunofluorescence indirecte à l'aide d'anticorps monoclonaux anti-cytokératine, démontrent inévitablement contaminées par des cellules stromales (~5%). Ces dernières ont un temps de doublement supérieur à celui des cellules épithéliales et peuvent ainsi envahir la culture rapidement, ce qui limite la croissance et la propagation de l'épithélium. L'optimisation des conditions de culture favorise la croissance et le maintien de deux types cellulaires constitue un étape essentielle quant à l'établissement d'un modèle de culture in vitro pour étudier les différentes interactions cellulaires et moléculaires impliquées dans le développement d'implants endométriosiques.

Contexte

Section :

Endocrinologie

Thème du colloque :

Endocrinologie

Hôte : Université du Québec à Rimouski

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Titre du colloque :

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