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Culture de coronavirus entérique des dindes sur cellules intestinales d'origine humaine

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Serge Dea

Résumé du colloque

La réplication rapide et efficace de différentes souches sauvages de coronavirus associés à des épidémies locales de gastroentérite chez des dindonneaux, fut obtenue sur la lignée cellulaire HRT-18, originant d'un adénocarcinome intestinal humain. L'addition de trypsine à l'inoculum et au milieu de culture des feuillets cellulaires s'avéra indispensable pour l'adaptation du virus. Au cours des cinq premiers passages, la formation de syncytia fut démontrée dans les cultures infectées, ainsi qu'une progression des titres infectieux jusqu'à 10^9.0 - 10^10.5 DECP/50 mL. Les cellules cellulaires empruntés lors de la réplication du virus furent identifiés par une technique d'immunomarquage indirecte utilisant un sérum de lapin hyperimmun dirigé contre la souche Minnesota du coronavirus entérique des dindes couplé à la protéine-A conjuguée à l'or colloïdal. Les virions produits ont les caractéristiques spécifiques du CEV: taille, présence d'une couronne de polymères au niveau de l'enveloppe, densité de flottaison de 1.18 - 1.20 g/mL et hémagglutination des globules de dinde. La maladie fut reproduite expérimentalement suite à l'inoculation orale de dindonneaux avec les surnageants des cultures cellulaires.

Contexte

host icon Hôte : Université d’Ottawa

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