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Culture primaire de macrophages alvéolaires par un système de perfusion continue

Gilles Forget
Pierre Sirois
GF

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Gilles Forget

Résumé du colloque

Les macrophages alvéolaires jouent un rôle important dans le système de défense contre les particules aérosolées qui arrivent jusqu'aux alvéoles. Ces cellules phagocytaires libèrent plusieurs substances inflammatoires lorsqu'elles entrent en contact avec des particules toxiques. Ces phénomènes furent étudiés par cultures périfusées. Les macrophages furent obtenus par lavages broncho-alvéolaires au PBS et cultivés dans des chambres construites d'un tube de verre fermé à 2 bouts par un robinet à 3 voies. Les cellules (3x10⁶) en suspension dans du milieu RPMI-1640 (20% de sérum bovin fœtal) sont introduites dans la chambre pour une période d'accolement de 1h à 37° après quoi le milieu est remplacé par du milieu frais (5% de sérum) contenant les particules solides à étudier. Les agents solubles sont ajoutés au milieu de perfusion. Les macrophages sont périfusés à 3.7° raison de 1mL/h et l'effluent est recueilli grâce à un collecteur de fraction pendant 1h. La viabilité des cellules témoins est alors d'environ 80% et 55% dans les chambres contenant de l'amiante. La mesure séquentielle des PG2 dans l'effluent a servi d'indice de la réponse inflammatoire des macrophages.

Contexte

Section :
Pharmacologie et toxicologie
news icon Thème du colloque :
Pharmacologie et toxicologie
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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