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Résumé du colloque
Jusqu’à présent, la formation de myotubes hybrides a été démontrée grâce à la présence d’isoenzymes hybrides. Cette technique permet d’établir quel pourcentage des fibres sont hybrides, mais ne permet pas de savoir quelles sont les fibres hybrides ni quel est le ratio de noyaux normaux et dystrophiques (N/D) assurant la restauration des fonctions de la fibre hybride. Nos expériences ont été faites à l’aide de cultures de myoblastes de souris C57 BI/101 normaux (+/+) et dystrophiques (mdx/mdx). Les myoblastes normaux ont été cultivés 48 h en présence de 1µM de 5-Bromo 2-Déoxyuridine (BrdU), substrat analogue à la thymidine, et ont été par la suite ajoutés aux cultures de myoblastes dystrophiques. Après une période variant de 5 à 10 jours, les cultures ont été fixées légèrement à l’éthanol. La présence des noyaux normaux peut alors être démontrée et quantifiée en révélant la BrdU avec un anticorps monoclonal. Cette technique nous permet d’identifier les myotubes hybrides et de déterminer quel pourcentage des noyaux sont normaux.
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