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Description d'une approche immunohistologique pour identifier des marqueurs morphogénétiques

Alain Thibodeau
Michel Vincent
Jean Duchaine
Jean-Luc Simard
AT

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Alain Thibodeau

Résumé du colloque

Afin d'identifier des molécules inconnues exprimées dans des phases spécifiques du développement, nous avons produit des anticorps monoclonaux contre différentes structures transitionnelles de l'embryon de poulet. Pour ce faire, des croûtes d'œuf immunisées avec des homogénats cellulaires de tissus embryonnaires provenant de régions morphogénétiquement dynamiques. Une méthode de criblage basée sur un test immunohistologique direct et rapide nous a permis de sélectionner les anticorps sécrétés dans le surnageant des hybridomes produits. L'utilisation de coques d'embryons de poulet inclus dans une base de polyéthylène glycol recrée de multiples avantages. Le polyéthylène glycol étant une cire soluble dans l'eau, le milieu de culture conditionné par un hybridome peut y être ajouté lorsque la coupe du matériel est terminée. De la même façon, les anticorps monoclonaux sélectionnés présents sur le tissu cible sont récupérés et réutilisés. Les anticorps sélectionnés sur la base de leur spécificité pour des structures embryonnaires transitionnelles ont été utilisés pour identifier des marqueurs morphogénétiques. Les anticorps monoclonaux, obtenus après fusion, ont été utilisés pour l'identification des marqueurs dans une lignée cellulaire, équivalant le cycle cellulaire ou associés à la matrice extracellulaire. Les cinétiques histologiques de l'incorporation visuelle d'anticorps monoclonaux produits au cours de la première ronde de criblage sont des atouts importants dans l'établissement d'un protocole de caractérisation ultérieure des marqueurs ainsi révélés.

Contexte

Section :
Biologie cellulaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

Biologie cellulaire
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