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Détermination cytofluorimétrique (FCM) des récepteurs d'oestrogène dans le cancer mammaire humain

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Pierre Beauré

Résumé du colloque

La détermination biochimique des récepteurs d'oestrogène à partir de fractions cytosoliques d'homogénats de tissus peut amener des résultats erronés puisque cette méthode ne prend pas en considération l'hétérogénéité de la tumeur. Nous avons développé une méthode utilisant la cytofluorimétrie (FIC) pour la mesure des récepteurs sur des cellules individualisées obtenues de masses tumorales après chirurgie et ce après leur reproduction des méthodes de individualisation. La dispersion mécanique s'est avérée la plus reproductible des méthodes d'individualisation. Nous avons utilisé l'oestradiol fluorescent (17-FE) durant 45 min. à 37°C avec des cellules individualisées sans pré-extraction avec dehydrostilbestrol (DES) ou tamoxifène (TAM) en excès de 100x. Nous avons observé une liaison spécifique de 17-FE (10^-10 M) avec des cellules d'adénocarcinome humain Ar-75 et MCF-7 par inhibition de la liaison avec le DES ou TAM. En raison de la méthode biochimique avec notre méthode sur les cytomètres en tissus frais, nous avons trouvé une bonne corrélation entre les deux méthodes. Les données statistiques seront présentées. Récemment, nous avons aussi observé que les cellules fixées avec 17-FE peuvent être fixées au formol pour analyse subséquente sur le FCM sans changement significatif de la granularité, le volume ou la fluorescence des cellules.

Contexte

host icon Hôte : Université du Québec à Chicoutimi

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