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Détermination des composants protéiques de la membrane de la bordure en brosse intestinale chez l'homme

DM

Membre a labase

D. Maestracci

Résumé du colloque

Les membranes isolées à partir d'intestins congelés furent fractionnées sur gradient de glycérol. Après lavage, les fractions obtenues sont solubilisées par du sodium dodécyl sulfate (SDS). L'addition de mercaptoéthanol aux fractions ainsi solubilisées permet l'étude des sous-unités protéiques. L'électrophorèse sur gel de polyacrylamide dans un tampon borate-sulfate-SDS permet d'obtenir de 27 à 34 bandes (suivant la fraction). Les poids moléculaires des protéines membranaires et de leurs sous-unités sont compris entre 2000 et 660,000, la principale sous-unité protéique correspondant à 48,000 daltons. Les bandes correspondant à la maltase, lactase, sucrase, phosphatase alcaline (PA) et tréhalase (T) ont été identifiées. La leucyl naphthylamidase (LNAase) et la γ-glutamyl-transpeptidase sont inactivées par le SDS. Après traitement des membranes à l'élastase et centrifugation le surnageant contient 80% de la sucrase, lactase, et LNAase mais seulement 10% de la PA, T et γ-glutamyltranspeptidase.

Contexte

host icon Hôte : Université d’Ottawa

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