Développement, caractérisation et optimisation d'un fluorimètre servant à la détection ultrarapide d'ADN provenant de pathogènes à l'aide d'un polymère fluorescent
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Résumé de la communication
Les pathogènes Candida Albicans et Candida Dubliniensis sont des champignons associés aux infections orales et oesophagiennes. Le génome de ces bactéries a été identifié; l'ADN ne diffère que par deux bases azotées sur une chaîne de 20 unités. Ces pathogènes à levure sont présents en petites quantités chez tous les individus. Cependant, chez les personnes ayant un système immunitaire affaibli, ce type d'infection bactérienne a beaucoup plus de chance de se développer et de se propager. Dans le cadre de ce projet, la présence de ces pathogènes est détectée en mettant l'ADN dénaturé en contact avec un polymère fluorescent qui présente une affinité de charges avec un des brins d'ADN des pathogènes, formant ainsi une structure appelée duplex. Le duplex est très peu fluorescent, mais lorsqu'il est mis en présence du brin d'ADN complémentaire, l'hybridation qui en résulte forme une structure fluorescente qui peut être détectée avec une grande sensibilité. Au cours de cette présentation, nous ferons état des résultats préliminaires obtenus lors du développement et de l'optimisation d'un fluorimètre dédié à la détection ultrasensible de ce biocapteur, en portant une attention particulière à l'étude de l'influence des paramètres optiques (fenêtre spectrale, fluence de la source) et de la procédure de préparation des échantillons (température, cinétique d'hybridation) sur la sensibilité et la sélectivité de détection.
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