Développement de deux méthodes de détection par immunofluorescence et par immunoperoxydase des anticorps produits contre les "Microsphères Denses" et contre les corpora amylacea obtenus de cerveaux humains
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Résumé du colloque
Nous avons extrait des "Microsphères Denses" (MSD) et des corpora amylacea (CA) de cerveaux humains âgés par des techniques routinières d'ultracentrifugation différentielle, suivies de gradients discontinus de sucrose ou de gradients continus de Percoll. Les préparations ainsi obtenues étaient injectées dans la veine péritonéale des souris et/ou par intraveineuse à des lapins. À la suite de plusieurs doses de rappel, les animaux étaient saignés et nous avons utilisé ces antisérums dans la mise au point des deux techniques immunologiques que nous avons développées pour détecter les anticorps réagissant contre les MSD et les CA. Afin de faciliter la lecture de faibles réactions positives, et d'améliorer la reproduction photographique des complexes fluorescents, nous avons introduit deux modifications à notre technique, soit : l'emploi de deux conjugués dans un même essai, et l'emploi du système avidine-biotine. Par ces méthodes, nous avons mis en évidence la production d'anticorps réagissant contre les MSD et les CA chez les lapins et les souris immunisés au moyen de nos extraits de cerveaux humains.
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