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Développement de nouveaux procédés d'électrophorèse en champ pulsé

Éric Brassard
Chantal Turmel
Michael Higgins
Gary W. Slater
Jean Noland
ÉB

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Éric Brassard

Résumé du colloque

L'électrophorèse d'ADN sur gel d'agarose est un outil largement utilisé en biologie moléculaire. Les méthodes conventionnelles d'électrophorèse en champ continu permettent une résolution maximale d'environ 50 Kilobases (Kb). En vue d'atteindre cette zone de résolution, nous avons développé un procédé d'électrophorèse en champ pulsé unidirectionnel. Cette nouvelle stratégie basée sur l'induction de différents paramètres intervenant dans la migration de l'ADN nous a permis d'étendre la taille de molécules jusqu'à environ 1000 Kb. Par cette stratégie, nous avons résolu les chromosomes intacts de plusieurs souches de levure et de micro-organismes de vértebré. De plus, cette méthode a été utilisée avec succès dans le cadre de l'analyse de la région qld du chromosome X chez l'humain. Egalement, cette électrophorèse a permis l'analyse de chromosomes artificiels de levure et d'ADN recombinant. En utilisant cette méthode, nous avons pu obtenir une séparation de fragments de 1000 Kb (par exemple). Ces résultats démontrent l'efficacité de cette technique pour l'analyse de grandes molécules d'ADN. Cette méthode a été utilisée avec succès dans la construction de cartes physiques de chromosomes dans les vecteurs YAC (yeast artificial chromosomes).

Contexte

Section :
Biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie moléculaire
host icon Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

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Thème du colloque :

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