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Développement de sondes β-lactamase spécifiques et universelles par la réaction en chaîne de la polymérase

Josée Mercier
M. Boissinot
J. Lachapelle
F. Couture
J.-M. Juteau
A. Huletsky
N. Bejaouit
R.-C. Levesque
JM

Membre a labase

Josée Mercier

Résumé du colloque

La diversité des β-lactamases plasmidiques capables d'hydrolyser les pénicillines et céphalosporines est remarquable chez les bactéries gram-négatives. Par clonage moléculaire, nous avons isolé 30 gènes bla et développé des sondes oligonucleotides couvrant des fragments d'ADN. Chaque fragment contenant bla a été cloné, fragmenté par sous-clonage et séquencé par la méthode didéoxy. L'analyse par ordinateur de ces séquences nous a permis de déterminer des régions hautement conservées. À partir de ces données, nous avons produit des oligonucleotides comme sondes et démontré leur spécificité par hybridation. La technologie du PCR a confirmé la spécificité de ces sondes bla tandis que des combinaisons rationnelles permettent la détection de plusieurs gènes bla. Ainsi, nous avons développé une série de sondes spécifiques et générales pour la détection de différentes β-lactamases à médiation plasmidique retrouvées en clinique, permettant l'étude évolutive de ces gènes.

Contexte

Section :
Biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie moléculaire
host icon Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

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