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Développement d'un rapporteur de recombinaison homéologue chez la plante Arabidopsis thaliana

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Liang Liang Li

Résumé du colloque

La recombinaison génétique est un processus qui permet l'échange d'informations génétiques. Lorsqu'elle implique des séquences semblables mais non totalement identiques, on dit qu'il s'agit de recombinaison homéologue. Cette divergence nucléotidique entre les séquences d'ADN participant à ces échanges est postulée, entraînant une réduction de la fréquence de recombinaison. Afin de mesurer facilement l'impact de la divergence nucléotidique sur la fréquence de recombinaison homéologue, nous avons développé un nouveau système rapporteur. Il s'agit d'un gène GUS (codant pour la b.glucuronidase) dans lequel nous avons introduit deux copies incomplètes d'un intron. Cela a pour effet de rendre inopérant le gène GUS. En cas de recombinaison entre ces deux copies de l'intron, on obtient un gène fonctionnel avec un seul intron complet. Un tel événement est mis en évidence par coloration chez les plantes transgéniques : un secteur bleu (sur fond blanc) indique un secteur où une telle recombinaison a eu lieu. Comme l'intron est non-codant, nous avons la possibilité d'y introduire des mutations de sorte que les deux copies de l'intron diffèrent l'une de l'autre par un nombre connu de différences nucléotidiques. L'impact de ces différences sur la fréquence de recombinaison peut ensuite être quantifié. Ce rapporteur sera ultérieurement employé pour déterminer l'impact de différents gènes de réparation de l'ADN sur la recombinaison homéologue.

Contexte

host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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