Dissection moléculaire des événements de signalisation précoces reliés à l'interféron gamma dans des cellules de macrophages J774 par une étude quantitative phosphoprotéomique
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Résumé de la communication
La phosphorylation réversible des protéines joue un rôle essentiel dans les voies de signalisation et permet la transmission et l’intégration des différents signaux provenant de stimulations intra et extra cellulaires. Dans le cadre d’un projet visant une meilleure compréhension des mécanismes régulant l’activation des macrophages par les cytokines, nous avons étudié la dynamique de phosphorylation survenant lors des événements de signalisation précoces liés à l’interferon- (IFN-) dans les cellules J774. L’activation des macrophages par l’IFN- active diverses voies de signalisation par l’intermédiaire de cascades de phosphorylation réversibles, dans le cas de réponse inflammatoires par exemple. L’impact de la stimulation à l’IFN- est bien défini au sein de la voie JAK/STAT mais les événements précoces qui s’y rattachent restent encore mal définit. Lors d’une précédente analyse, une étude cinétique a permis de mettre en évidence la modulation différentielle de la phosphorylation suite à un traitement de 5 min à 180 min. Des temps de 5 min et 30 min ont été retenus pour les analyses subséquentes comme montrant les niveaux de phosphorylation différentielle les plus intéressants. Les peptides issus de la digestion trypsique des extraits protéiques cytosoliques et nucléaires de cellules J774 ont été fractionnés par chromatographie d’affinité (TiO2) afin d’enrichir les phosphopeptides. Par la suite, ces phosphopeptides ont été séparés par chromatographie d’échange de cations (
Résumé du colloque
Plusieurs conférenciers de marque participeront à ce colloque, et nous coordonnons avec le réseau national Canadien de protéomique l’attribution d’un prix annuel qui pourrait être décerné lors de cet événement.
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