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Résumé du colloque
Le t-RNA total est isolé du cerveau de veau en utilisant la technique d'extraction au phénol et ensuite purifié par chromatographie sur Séphadex G-200. Le t-RNA ainsi obtenu est désaminoacylé par traitement à pH alcalin et cette préparation est utilisée comme substrat pour les aminoacyl t-RNA synthétases. Les synthétases sont préparées à partir d'un surnageant à haute vitesse (100,000xg; 2 hres), et sont purifiées par chromatographies successives sur colonne de Séphadex G-100 et DEAE-cellulose. Le taux d'aminoacylation du t-RNA est mesuré en variant divers paramètres, comme les concentrations de t-RNA et d'enzyme et les temps d'incubation. Vingt différents acides aminés marqués au 14C sont utilisés un à un. Quatre différentes régions du cerveau, ex.: cerveau total, cervelet, cortex et reste du cerveau ont servi comme source de synthétases. Le foie a été utilisé pour établir une comparaison avec un tissu différent. Les résultats obtenus avec ces séries d'expérience nous ont permis de déterminer la distribution des t-RNA et des aminoacyl t-RNA synthétases spécifiques pour chacun des vingt acides aminés dans différentes régions du cerveau.
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