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Dosage du méthotrexate par chromatographie gazeuse en colonne capillaire couplée à un spectromètre de masse de type "Ion Trap"

Diane Brulé
Jean-Pierre Schmit
Jacques Maloiy
DB

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Diane Brulé

Résumé du colloque

Le méthotrexate (MTX) est un agent antinéoplasique utilisé depuis près de 40 ans pour le traitement d'une grande variété de cancers. C'est l'un des agents anticancéreux dont on connaît le mieux la pharmacocinétique ainsi que les mécanismes d'action et de résistance. Cependant, lorsqu'il s'agit de doser le MTX, aucune méthode analytique n'est actuellement suffisamment sensible pour détecter cette drogue aux niveaux de concentration intracellulaires. Afin de répondre à cette exigence de dosage, nous avons adapté la solution et à l'origine de notre ignorance pharmacodynamique du MTX. Dans cette étude, nous avons utilisé la chromatographie gazeuse en phase capillaire couplée à un spectromètre de masse de type "Ion Trap" (ITD de Finnigan) pour mettre au point un modèle de détection intracellulaire du MTX. Après addition d'un mélange de MTX et de son analogue de marquage, le MTX est extrait des cellules à l'aide du N-méthyl-N-triméthylsilyl trifluoroacetamide (MSTFA). L'évaluation de la cinétique d'élimination du MTX est déterminée par chromatographie gazeuse et spectrométrie de masse (GC-MS). Le pic de base du MTX est détecté à 440 m/z, et est utilisé comme référence pour établir la courbe de calibration permettant de doser le MTX désiré (SIM). Par cette méthode, des concentrations du MTX aussi faibles que 10-10 mol/l sont détectées. Ces sensibilités sont suffisantes pour permettre l'accès à l'écheveau des études pharmacologiques du Québec.

Contexte

Section :
Biochimie
news icon Thème du colloque :
Biochimie
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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