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Résumé du colloque
Nous décrivons une méthode de dosage du rétinol (vitamine A) par chromatographie liquide à haute pression. Cette méthode ne nécessite que très peu de sérum (100 µl), le tout est traité à l'hexane pour en extraire le rétinol. L'acétate de rétinyle est utilisé comme étalon interne. La méthode est expérimentée au moyen de différents étalons, soit le rétinol, l'acétate de rétinyle, l'acide rétinoïque et le palmitate de rétinyle, afin d'en assurer la spécificité et la reproductibilité. L'extrait lipidique du sérum est élué sur une colonne d'octadécylsilice (ODS-618) par un mélange de méthanol:eau (95:5) préfiltré sur un filtre de 45µ. La chromatographie est complétée en moins de 15 minutes et le rétinol est quantifié par l'intégration de la surface sous la courbe correspondant au temps de rétention de chaque composé. Au moyen d'un détecteur à 274 nm nous pouvons doser des valeurs jusqu'à 80 ng de rétinol par injection ou 3.2 ng/ml de sérum.
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