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Effet des séquences poly(dG)-poly(dC) sur la recombinaison de l'ADN

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Stéphane Rioux

Résumé du colloque

Divers groupes, incluant le nôtre, ont démontré que les séquences poly(dG)-poly(dC) de l'ADN en superhélice peuvent adopter des structures en triple hélice in vitro. Une triple hélice du type GGC peut être formée en présence de Mg2+ tandis qu'on observe une triple hélice d'AGC (ADN-H) et faiblement à pH acide. Récemment, il a aussi été démontré que ces séquences pouvaient former des structures en triple hélice in vivo chez les levures. Nous avons démontré que ces séquences polymorphiques augmentaient la fréquence de recombinaison homologue et intrachromosomique et ceci en présence de protéines de recombinaison. De plus, nous avons démontré que ces séquences pouvaient agir comme sites préférentiels pour la recombinaison homologue. En utilisant un substrat de recombinaison plasmidique, nous avons construit des plasmides de recombinaison, avec des dérivés du pBR322. Ces substrats, une séquence d(G29)-d(G29) est insérée entre le Eagl du gène tetR. Pour permettre une recombinaison homologue, ces molécules contiennent également une région homologue de 1,5 kb. En présence de protéines de recombinaison, nous avons observé une augmentation significative de la fréquence de recombinaison. De plus, nous avons démontré que la présence de l'homopolymère augmentait jusqu'à 2 fois la fréquence de recombinaison. Ces résultats sont intéressants en médecine moléculaire et en thérapie génique pour la transfection de l'ADN. Nous avons aussi démontré que ces séquences étaient des structures particulières d'adoption poly(dG)-poly(dC).

Contexte

news icon Thème du colloque :
Biochimie, biologie moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Rimouski

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Titre du colloque :

Biochimie, biologie moléculaire

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