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Effets de l'ozone sur la synthèse protéique du bactériophage T7

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Pierre L'hérault

Résumé du colloque

Afin de mieux comprendre les effets de l'ozone sur la reproduction du bactériophage T7, nous avons étudié la cinétique de la synthèse protéique du phage par l'incorporation d'acides aminés radioactifs. Des suspensions phagiques furent exposées à 50 ppm d'ozone pendant 1 à 3 minutes par barbottage direct du gaz dans les différentes suspensions. Des bactéries (Escherichia coli B) dans du bouillon Thomas et Abshon contenant 1 uCi d'un mélange d'acides aminés radioactifs L-[U-14C] furent infectées par des phages traités à l'ozone. À intervalles de temps réguliers, des échantillons de 100 ul furent déposés sur des filtres disques en fibres de verre (Whatman GF/A). Ces filtres furent plongés dans 5% d'acide trichloroacétique (TCA) froid contenant 100 ug d'un mélange d'acides aminés 12C pendant 10 minutes. Par la suite, les filtres furent resuspendus dans 5% de TCA froid, incubés à 90 C pendant 30 minutes, lavés deux fois avec 5% de TCA frais et, finalement, lavés deux fois avec de l'éthanol 95%. Les filtres séchés à l'air furent plongés dans du cocktail à scintillation pour en déterminer la radioactivité. D'après nos résultats, on remarque une augmentation de l'incorporation des acides aminés après traitement à l'ozone suivie par une réduction de l'incorporation d'étiquettes radioactives. Nos résultats semblent suggérer que l'ozone affecte sensiblement la synthèse protéique du bactériophage T7.

Contexte

host icon Hôte : Université de Montréal

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