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Résumé du colloque
Les membranes purifiées à partir de grains zymogènes apparaissent comme des vésicules lorsqu'on les examine au microscope électronique. En l'absence de marqueurs morphologiques qui pourraient indiquer si les vésicules ont toutes la même polarité, nous avons examiné leur comportement dans un champ électrique assurant que les deux faces de la membrane pourraient porter des densités de charges différentes et donc migrer de façon différente. Nous avons fait les expériences dans une colonne d'électrophorèse liquide, remplie avec une solution de sucrose 0.65M, tamponnée à pH 6.0. La colonne était stabilisée par un gradient linéaire H2O/D2O, et le courant était ajusté à 3 mA, 300V, ou 250V. La migration durait de 2 à 3 heures. Nous avons trouvé que les grains zymogènes migrent dans un champ électrique avec une mobilité apparente légèrement négative, proportionnelle à celle de la membrane, et ils fractionnent. Les membranes purifiées se répartissent également vers le pôle positif avec apparemment deux mobilités. Nous concluons que, soit les vésicules ont toutes la même polarité (normale) ou que si des vésicules inversées sont présentes les charges sur les deux faces de la membrane sont identiques.
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