Colloque

Étude de la formation d'adduits sur l'ADN d'hépatocytes de rat en culture primaires exposés au 2-acétylaminofluorène

Danielle Jutras

Michel Marion

Francine Denizeau

Membre a labase

Danielle Jutras

Résumé du colloque

Il est admis que le processus de la cancérogenèse chimique est initié par la formation d'adduits sur l'ADN suite à l'alkylation des bases nucléiques par les substances génotoxiques. Normalement les cellules possèdent des mécanismes aptes à réparer ces lésions dont celui d'excision-resynthèse capable de renouveler la portion d'ADN endommagée. Le but de cette étude est de mieux comprendre les interactions des cancérogènes génotoxiques avec les cellules d'un tissu cible, le foie, afin d'augmenter l'apparition d'adduits d'ADN et à leur réparation. L'étude porte sur l'effet de certains inhibiteurs d'enzymes susceptibles d'être impliquées dans la réparation. Pour ce faire, les hépatocytes en culture primaire préparés par la technique de perfusion à la collagénase sont soumis à un cancérogène lipophile, le 2-acétylaminofluorène, marqué radioactivement; l'ADN des cellules exposées est ensuite extrait et à chaque fois suivant les cellules sont traitées au SDS et à la protéinase K; ceci est suivi d'extractions au phénol puis au chloroform/alcohol isoamylique. L'ADN est alors précipité avec de l'éthanol puis redissous; on en détermine la quantité totale par mesure à l'U.V. et le contenu radioactivité par comptage à scintillation. Les résultats obtenus avec les inhibiteurs des ADN polymérases conduisent à un marquage moindre de l'acide nucléique du foie alors que la topoisomérase et la ligase ne réduisent n'entraînent pas de changement. L'ensemble des résultats suggère que certains inhibiteurs pourraient intervenir autrement que par une inhibition directe de la réparation.

Contexte

Section :

Biotechnologie

Thème du colloque :

Biotechnologie

Hôte : Université d’Ottawa

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Titre du colloque :

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