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Étude de la régulation de la transcription du gène encodant la molécule d'adhésion intercellulaire ICAM-1

Nathalie Fugère
Nathalie Fugère
Thomas Parks
NF

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Nathalie Fugère

Résumé du colloque

ICAM-1 joue un rôle clé dans la réponse immunitaire en permettant l’adhésion des leucocytes aux cellules cibles. C’est une molécule ubiquiste dont le niveau d’expression est grandement stimulé par différentes cytokines et par l’acide rétinoïque. Un des défis significatif dans la machinerie transcriptionnelle concerne l’identification de tyrosine kinases et de tyrosine phosphatases, couplées à des récepteurs membranaires qui interviennent pour optimiser la transcription génique. La phosphorylation contrôle en particulier l’activité de nombreux facteurs de transcription comme les membres des familles STAT, NFkB et ETS. Nous avons identifié les membres de la famille STAT et ETS comme des cibles potentielles impliquées dans la régulation de la transcription d’ICAM-1 après traitement au peroxovanadium (bpvPIC), un inhibiteur de tyrosine phosphatase. Ceci s’est fait par transfection transitoire, dans des lignées cellulaires humaines, à l’aide d’un système de gène rapporteur comprenant le promoteur d’ICAM-1 et différents mutants de délétion, clônés en amont du gène encodant la luciférase. Nous avons d’abord étudié l’action du peroxovanadium pendant 8 et 24 H à des concentrations variant de 0.1, 1 et 10 mM sur la régulation de la transcription d’ICAM-1. Les résultats ont démontrés une stimulation significative de la transcription du promoteur intacte d’ICAM-1 à 10 mM de l’ordre de 4 fois à 8 H et de 18 fois à 24 H. Nous avons comparé l’activité transcriptionnelle du promoteur intact d’ICAM-1 avec celle de plasmides comportant des délétions dans les sites STAT et ETS localisés entre -77 et -150 en amont du site transcriptionnel. La délétion de STAT et ETS abolit la capacité transcriptionnelle du promoteur d’ICAM-1 de 3 fois à 8 H et 12 fois à 24 H après traitement au bpvPIC. Des études d’interactions ADN/protéines par rétention sur gel ont démontré une liaison spécifique de la protéine STAT. Ces études serviront à disséquer les différentes voies de signalisation responsable de la régulation fine de la transcription.

Contexte

Section :
Biologie cellulaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire
manager icon Responsables :
Alan Anderson
host icon Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

Biologie cellulaire
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