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Résumé du colloque
Un abaissement de la température ambiante stimule, chez la luzerne, l'expression de plusieurs gènes, principalement au niveau des racines et du collet. En comparant l'abondance des produits de transcription de ces gènes dans les tissus de plusieurs variétés de luzerne, il est apparu que leur expression était plus intense chez les variétés résistantes au froid que chez les variétés sensibles. Cette observation soulève l'hypothèse que ces gènes seraient directement impliqués dans la tolérance des végétaux au froid. Pour l'un d'entre eux, surnommé MasCla, nous avons extrait, par clonage, la protéine correspondante, afin, d'une part, de vérifier que celle-ci est bien impliquée en réponse au froid, et d'autre part, en déterminer le rôle fonctionnel dans la cellule. Tout d'abord, un polypeptide de fusion, contenant la séquence d'acides aminés de MasCla, a été synthétisé dans E.coli au moyen du système d'expression hétérologue pMAL®. Injecté dans un lapin, ce polypeptide a permis d'obtenir un antisérum capable de reconnaître une protéine de luzerne présente uniquement dans des tissus soumis à de basses températures. Le poids moléculaire apparent de cette protéine, de l'ordre de 20 kDa, est en concordance avec le poids théorique du produit de MasCla. Il semble donc bien que l'antisérum obtenu à partir de la protéine de fusion reconnaît la protéine végétale elle-même. Dès lors, nous envisageons d'utiliser cet antisérum pour des travaux de purification, de quantification et d'immunolocalisation du produit de MasCla, afin de déterminer dans quelle mesure et par quels mécanismes cette protéine est impliquée dans la tolérance au froid des tissus végétaux.
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