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Étude de l'interaction ADN-protéines par protection aux nucléases in vivo et par amplification de séquences (PCR) linéaire

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Benoit Leblanc

Résumé du colloque

Le gène du précurseur 40S de l'ARNr chez X. laevis est une répétition en tandem d'environ 400 unités séparées par une région intergénique impliquée dans le contrôle de la transcription du gène. Ce contrôle implique donc plusieurs séquences d'ADN et plusieurs protéines. L'interaction entre ces deux éléments a déjà fait l'objet d'études par protection à la DNaseI in vitro, et on a pu définir des régions protégées par des facteurs de transcription purifiés. Nous avons ici utilisé la technique d'amplification linéaire de séquences par la polymérase Taq (PCR linéaire) pour permettre ces études in vivo, en effectuant des expériences de protection nucléase au même des noyaux cellulaires. Nous avons pu définir les différents patrons de protection et avons montré que le patron est proportionnellement aux activités nucléaires auxquelles il est généré in vitro, et ce au niveau de régions telles le promoteur du gène, son terminateur et ses régions amplificatrices (promoteurs intergéniques et répétitions amplificatrices de 60/81 pb).

Contexte

news icon Thème du colloque :
Biologie moléculaire
host icon Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

Biologie moléculaire

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