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Étude des facteurs favorisant la formation de nodules méristématiques in vitro chez le Pin gris (Pinus banksiana Lamb.) et caractérisation de leur patron morphogénétique

Julie Charbonneau
Sylvie Laliberté
JC

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Julie Charbonneau

Résumé de la communication

La production de nodules méristématiques à partir d’embryons zygotiques (EZ) chez Pinus banksiana semble une voie prometteuse de micropropagation. Le présent projet visait à établir les conditions optimales d’imbibition des graines préalablement à la mise en culture des EZ et à étudier les patrons morphogénétiques obtenus. Les graines ont été soumises à 16 traitements faisant varier les paramètres suivants : lumière ou obscurité, température (4 degrés C ou 28 degrés C) et durée d’imbibition (16, 24, 36, 48, 60 ou 72 heures). Par la suite, les embryons zygotiques extraits des graines ont été cultivés en milieu liquide (1/2 SH, 30g/l de saccharose, 14 µM de kinétine et 10 µM de BAP) sous agitation constante (100 rpm) pendant 4 semaines. Le traitement d’imbibition de 24 heures, à 28 degrés C et à l’obscurité, a induit le pourcentage de nodules le plus élevé (28 %) alors que 23,7 % des EZ ont produit des cals. Par ailleurs, le moins efficace est celui à 4 degrés C, à l’obscurité et d’une durée de 24 heures avec respectivement 7,9 % et 1,14 % des embryons formant des nodules ou des cals, indiquant un effet négatif de la basse température au cours de la période d’imbibition. Les essais à la lumière ont produit, en moyenne, un taux de nodules plus bas qu’à l’obscurité. Le meilleur traitement a été sélectionné pour analyser l’évolution du cycle cellulaire et de la quantité absolue d’ADN nucléaire en relation avec le type de développement in vitro. La période critique de différenciation se situe entre la 2e et la 3e semaine de culture, les nodules et les cals étant identifiables à la 3e semaine. Les fluctuations du cycle cellulaire et de la quantité absolue d’ADN, mesurées à l’aide de la cytométrie en flux, sont des indicateurs des changements morphologiques qui surviennent au cours des quatre semaines de culture.

Contexte

Section :
Biologie végétale
news icon Domaine de la communication :
Biologie végétale
host icon Hôte : Université de Montréal

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Thème du communication :

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