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Résumé du colloque
Le RNA 16S de la sous-unité ribosomique 30S d'E. coli est subdivisé en 3 principaux domaines structuraux. À partir d'un plasmide contenant le gène du RNA 16S, nous avons construit un dérivé, pFD34, qui contient une portion du gène du RNA 16S, depuis le début du domaine 3 jusqu'à l'extrémité du gène, directement en aval d'un promoteur T7. La transcription in vitro de ce plasmide linéarisé au site RsaI produit le domaine 3 du RNA 16S. Des études avec diverses sondes chimiques indiquent que ce fragment adopte une conformation semblable à celle qu'il possède à l'intérieur du RNA 16S. Lorsqu'il est combiné avec des protéines ribosomiques, il s'associe spécifiquement aux protéines S7, S9, S11 et S19 pour former une "mini-sous-unité 30S" qui peut se lier à la sous-unité ribosomique 50S. Des dérivés de pFD34 ont été construits après digestion avec la nucléase Ba/31. La transcription de ces dérivés permet d'obtenir des fragments du domaine 3 dont nous examinâmes la capacité à former ribosome 3'5'.
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