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Résumé de la communication
Leishmania est un parasite protozoaire pathogène qui infecte plus de 12 millions de personnes. L’antimoine est le traitement de choix contre ces infections depuis plusieurs décennies. Malheureusement, les cas d’infection par des parasites résistants à l’antimoine se multiplient. Dans le laboratoire, nous étudions les mécanismes de résistance aux métaux lourds et aux antifolates chez Leishmania. La compréhension des mécanismes de résistance nous a amené à caractériser des sentiers métaboliques complexes et à identifier plusieurs transporteurs membranaires impliquées dans la résistance aux métaux et aux antifolates. Nous avons isolé des fragments PCR de tous les gènes impliqués dans les sentiers métaboliques. Les puces comportent des fragments PCR d’une cinquantaine de gènes, dont l’expression est analysée en hybridant l’ADNc marqué extrait de souches sensibles ou résistantes aux métaux ou aux antifolates. Nous avons étudié l’expression d’un mutant résistant au méthotrexate grâce aux puces à ADN. Pour un mutant, nous avons déterminé que le gène de la dihydrofolate-réductase était surexprimé, tandis que l’expression du transporteur des folates était diminuée. Chez un mutant résistant aux métaux, nous avons observé que l’expression d’un transporteur de type ABC et de l’ornithine décarboxylase était augmentée. Ces résultats ont été confirmés par hybridation de type Northern. Nos puces à ADN servent actuellement à tester de nombreux mutants, ce qui devrait nous permettre de caractériser rapidement leur génotype et possiblement de découvrir de nouveaux mécanismes de résistance.
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