Communication

Étude du frameshift programmé du virus de l'immunodéficience humaine (VIH) dans un système bactérien

Mélissa Léger

Martin Baril

Lea Brakier-Gingras

Membre a labase

Mélissa Léger

Résumé de la communication

La synthèse de Gag-Pol, le précurseur des enzymes du VIH, requiert un changement du cadre de lecture (frameshift) programmé au niveau d’une séquence glissante spécifique lors de la traduction de l’ARN messager viral par les ribosomes. Nous avons montré qu’on peut reproduire ce frameshift dans un système bactérien et étudier l’effet de mutations dans le ribosome sur ce frameshift. Nous utilisons un plasmide avec un ARN à opéron ribosomique modifié tel que seuls les ribosomes avec un ARN 16S codé par le plasmide traduisent l’ARNm correspondant à un gène rapporteur, codant pour la luciférase de la luciole. Au début de la région codant pour la luciférase, nous avons introduit des insertions de différentes longueurs, contenant la région de l’ARN du VIH où se produit le frameshift. Il s'agit soit uniquement de la séquence glissante spécifique, soit de cette séquence suivie d’une tige/boucle agissant comme signal stimulateur, soit enfin d'une insertion plus longue qui contient l’entièreté des signaux permettant le frameshift du VIH et où la tige/boucle est plus complexe que dans l’insertion précédente. Les insertions sont telles que seuls les ribosomes faisant le frameshift produisent la luciférase. Nous avons observé que le frameshift se produit dans les bactéries et que son efficacité augmente en fonction de la longueur du segment inséré au début de la région codante de la luciférase de la même manière que dans un système eucaryote. Ceci démontre la validité du système bactérien pour étudier les mécanismes régissant le frameshift du VIH. Nous avons entamé une étude de l’effet de mutations dans l’ARN 16S, qui identifie les régions de l’ARN 16S contrôlant l’efficacité du frameshift.

Contexte

Section :

Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire

Domaine de la communication :

Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire

Hôte : Université Laval

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Thème du communication :

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