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Étude du régulon de Yap2p chez la levure Saccharomyces cerevisiae

ÉL

Membre a labase

Émilie-Anabelle Lévesque

Résumé de la communication

Les gènes YAP1 et YAP2 codent pour des facteurs de transcription bZip impliqués dans la réponse au stress oxydant (RSO) chez la levure. Yap1p régule l’expression de gènes jouant un rôle dans le métabolisme de la thiorédoxine et du glutathion ainsi que celle de gènes codant pour des transporteurs conférant une résistance croisée aux cytotoxiques. La surexpression de Yap2p cause la résistance à certains oxydants, toutefois ses cibles transcriptionnelles ne sont pas connues. Nous avons utilisé la technologie des puces à ADN afin de les identifier. Deux souches isogéniques ont été utilisées, l’une portant une délétion du gène YAP2 et l’autre le surexprimant. Les ARNs de ces souches ont servi à sonder des biopuces à haute densité correspondant au génome complet de la levure. Les résultats de cette expérience montrent que la surexpression de Yap2p induit l’expression de gènes impliqués dans la RSO, incluant : AAD4, AAD6, OYE3, et DLD3 (déshydrogénases), ARR2 (arséniate réductase), GTT2 (glutathion transférase), GPX2 (glutathion peroxydase), ainsi que celle de gènes codant pour des transporteurs membranaires tels que HXT5, FLR1, ATR1, PDR5 et YCF1. L’expression des gènes OYE3, AAD6, GTT2, FLR1, ATR1, et YCF1 est aussi régulée par Yap1p tandis que celle des autres gènes semble spécifiquement régulée par Yap2p. Nous avons aussi construit un vecteur, YIpHIS3, contenant plusieurs sites de clonage en 5’ du gène rapporteur lacZ et pouvant s’intégrer au locus HIS3 de la souche BY4741/4742 (ayant servi au projet de délétion systématique des gènes de levure). Ce vecteur nous permettra d’étudier, par des expériences de transactivation, les mécanismes par lesquels Yap2p régule l’expression de ses cibles, de façon indépendante ou en collaboration avec Yap1p.

Contexte

news icon Domaine de la communication :
Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire
host icon Hôte : Université Laval

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Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire