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Résumé du colloque
Le site de fixation de la streptomycine sur la sous-unité 30S du ribosome bactérien est un site complexe où plusieurs protéines sont impliquées. Nous avons utilisé une nouvelle approche expérimentale pour caractériser ce site en liant covalemment la [2,3-3H]dihydrostreptomycine à la sous-unité 30S à l'aide d'un agent pontant, le phényldiglyoxal. À l'aide des techniques de filtration sur Millipore et de centrifugation au travers d'un gradient de saccharose, nous avons montré que, dans ces conditions adéquates, il est possible de lier covalentiellement la [2,3-3H]dihydrostreptomycine à la sous-unité 30S et que cette liaison est spécifique. Après ce pontage, les protéines ribosomiques sont extraites et fractionnées par électrophorèse sur gel et polyacrylamide à une ou deux dimensions, et des techniques de fluorographies sont utilisées pour détecter les protéines liées à la [2,3-3H]dihydrostreptomycine. Les résultats sont analysés en fonction de l'ensemble des données actuelles concernant la localisation du site de fixation de la streptomycine sur la sous-unité 30S.
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