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Étude en cryodécapage de la membrane des grains de zymogène du pancréas de rat

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C. Cabana

Résumé du colloque

Les grains de zymogène du pancréas de rat isolés par la méthode de Lamy et al. ont été examinés en cryodécapage. Le rôle du fixateur et du cryoprotectant a été étudié. La fraction purifiée est fixée en glutaraldéhyde 3% en paraformaldéhyde 1% en tampon MES-sucrose à pH 6.0 pendant 45 min. Après centrifugation à 5,000 rpm pendant 5 min, le culot placé dans une solution de 40% de sucrose pendant 30 min, puis congelé à -150°C au Freon 22 refroidi à l'azote liquide et fracturé sous vide dans l'appareil Balzers. Les répliques obtenues en platine-carbone subissent différentes attaques puis sont examinées dans un microscope à balayage EM 300. Après fixation à la glutaraldéhyde en agarose ou glycérol ou 10, 25, 50% de sucrose, les grains de zymogène sont dissociés en présence de 0.5-3% de Lubrol PX, mais ils sont stables en présence de 0.5% de Lubrol PX. Les grains de zymogène sont dissociés en présence de 0.5-3% de Lubrol PX, mais ils sont stables en présence de 0.5% de Lubrol PX. Les faces des grains de zymogène montrent en certains endroits des microvillosités associées aux membranes, tandis que d'autres endroits sur les faces A ou B leur répartition est inhomogène. Des variations en nombre et en volume ont été observées après les divers traitements.

Contexte

Section :
Biochimie
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Biochimie
host icon Hôte : Université de Sherbrooke

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Titre du colloque :

Biochimie

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