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Étude en "patch clamp" de la membrane basolatérale du tubule rénal contourné proximal (TCP), isolé et perfusé

Jon Beck
Raynald Laprade
Annette Hurst
Jean-Yves Lapointe
JB

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Jon Beck

Résumé du colloque

La présente étude démontre qu'on peut utiliser avec succès la technique de "patch clamp" sur la membrane basolatérale du TCP perfusé après traitement de la membrane basale avec une faible concentration de collagénase. On peut alors observer, tout en mesurant le potentiel membranaire (Vm), l'activité de canaux potassiques dans des conditions où le transport transépithélial de sodium est isolé ou inhibé. En présence de 140 mM K+ dans la pipette, l'addition de glucose et d'alanine dans la lumière tubulaire réduit Vm de -36 à -4 mV et le courant entrant de 25 à 1.2 pA (n=4). Le canal observé est du type "inward rectifier" en absence de glucose et d'alanine, possède une conductance de 61.6 ± 0.3 pS et un potentiel d'inversion du courant de 42 mV (n=4). En présence d'un excès d'alanine, ce potentiel est réduit à -20 mV tandis que la conductance n'est pas changée. Lorsque le Na+K+ATPase est inhibée, on observe une inhibition complète des canaux potassiques, inhibition qui disparaît en configuration "inside-out". Ces résultats montrent qu'il existe possibilité de régulation des canaux ioniques sur la membrane basolatérale du TCP perfusé et qu'il existe un véritable "crosstalk" entre les transporteurs des membranes apicale et basolatérale et les canaux potassiques de la membrane basolatérale.

Contexte

Section :
Biophysique
news icon Thème du colloque :
Biophysique
host icon Hôte : Université de Montréal

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Titre du colloque :

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