Communication

Étude fonctionnelle de trois transporteurs ABC de Candida albicans chez Saccharomyces cerevisiae

Christian Gauthier

Roni Daoud

Elias Georges

Martine Raymond

Sandra Weber

Anne-Marie Alarco

Membre a labase

Christian Gauthier

Résumé de la communication

La résistance multiple aux drogues est causée par la surexpression de transporteurs membranaires qui expulsent une grande variété de composés hors de la cellule. Chez Candida albicans, les gènes CDR1, CDR2 et CDR3 codent pour des transporteurs ABC (ATP-binding cassette) qui sont très homologues. De ces trois protéines, seules Cdr1p et Cdr2p confèrent la résistance à des composés cytotoxiques, incluant les antifongiques azolés utilisés en clinique. Afin d'étudier les propriétés structurales et fonctionnelles de ces transporteurs, nous avons développé un système d'expression hétérologue chez la levure Saccharomyces cerevisiae. Nous avons cloné chacun des trois gènes dans un vecteur d’expression multicopies et transformé les plasmides ainsi obtenus dans une souche de S. cerevisiae hyper-sensible aux drogues (TY310). Nous avons produit des anticorps isoformes-spécifiques (anti-Cdr1p, -Cdr2p, -Cdr3p) et générique (anti-Cdrp) et avons démontré, par immunobuvardage et immunofluorescence, que les trois protéines ont des niveaux d'expression et des profils de localisation cellulaire semblables chez ces transformants. L'expression de CDR2 et, à un moindre niveau celle de CDR1, confère la résistance à la rhodamine 123 (Rh123), un composé cytotoxique fluorescent, alors que l’expression de CDR3 n’a aucun effet. Les transformants TY310 exprimant CDR1 et CDR3 accumulent autant de Rh123 que la souche contrôle, lors d'analyses par cytométrie en flux, alors que les transformants CDR2 sont dix fois moins fluorescents. Des expériences de marquage avec le dérivé photoactivable 125I-(ASA)-Rh123 démontrent que les trois protéines lient la Rh123. Nous utiliserons ce système d'expression pour déterminer, à l'aide d'approches génétiques et biochimiques, les domaines protéiques et les résidus responsables des différentes caractéristiques de ces trois transporteurs.

Contexte

Section :

Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire

Domaine de la communication :

Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire

Hôte : Université de Montréal

Découvrez d'autres communications scientifiques

Dans le même domaine
Du même congressiste

Thème du communication :

Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire

Complexité des signaux contrôlant un frameshift programmé -1 essentiel à la prolifération du VIH

Dominic Dulude

Apoptose des lymphocytes pulmonaires : rôle dans l'alvéolite allergique extrinsèque

Christian Laflamme

Mise au point de la méthode signature-tagged-mutagenesis (STM)

Julien St-Jean

Voir tous les contenus de ce communication

Autres communications du même congressiste :

Domaine de la communication :

Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire

Étude fonctionnelle de trois transporteurs ABC de Candida albicans chez Saccharomyces cerevisiae

Christian Gauthier

Étude fonctionnelle de trois transporteurs ABC de Candida albicans chez Saccharomyces cerevisiae

Christian Gauthier

Étude fonctionnelle de trois transporteurs ABC de Candida albicans chez Saccharomyces cerevisiae

Christian Gauthier