Colloque

Étude moléculaire de mutations instables au locus hprt chez les cellules CHO

Gaël Ouellette

Edward C. Bradley

Membre a labase

Gaël Ouellette

Résumé du colloque

Lors d'expériences d'isolement de mutants au locus de "hypoxanthine phosphoribosyl transférase (HPRT) induits par l'éthyle méthane sulfonate chez les cellules CHO, nous avons pu aussi obtenir des révertants à haute fréquence. Ces révertants se divisent en deux classes: une classe qui conserve le phénotype HPRT* de façon stable et une autre dont les révertants sont instables et balancent entre les phénotypes HPRT* et HPRT-. Nous avons accordé plus d'intérêt au phénomène d'instabilité génétique observée chez les cellules de la seconde classe. Nous avons étudié le locus hprt des mutants, des révertants et des souches parentales sauvages par la technique de "Southern blot" après avoir fragmenté l'ADN avec différents enzymes de restriction. Des polymorphismes ont été détectés chez certains révertants avec les enzymes Hpa II et Msp I, indiquant que l'état de la méthylation de certains sites serait donc changé. Des changements chez deux mutants HPRT* indépendants ont aussi été observés avec Msp I, qui n'ont pas été affectés par la méthylation dans certaines conditions. Une analyse préliminaire par des ARN total par "Northern blot" semble montrer que les niveaux d'ARN est presque équivalent chez les mutants et les révertants, restant plus élevés que celui prévu par les essais enzymatiques de l'HPRT.

Contexte

Section :

Biochimie cellulaire et moléculaire

Thème du colloque :

Biochimie cellulaire et moléculaire

Hôte : Université du Québec à Chicoutimi

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Titre du colloque :

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