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Etude, par microscopie électronique, de l'interaction de la RNA polymérase avec le DNA du phage T7 alkylé par les méthanesulfonates de méthyle et d'éthyle

M. Guertin
Mamet-Bratley Mamet-Bratley
M. Zollinger
MG

Membre a labase

M. Guertin

Résumé du colloque

L'alkylation du DNA du phage T7 diminue son activité matrice pour la transcription in vitro. Afin de mieux comprendre le mécanisme de cette inhibition, nous avons étudié la première étape de la transcription, l'interaction de la RNA polymérase avec le DNA du phage T7 alkylé. Nous avons, par microscopie électronique, pu mettre en évidence cette interaction. L'analyse, par cette méthode, de l'interaction du DNA non alkylé avec la RNA polymérase a donné les résultats suivants: 1. L'alkylation du DNA ne change l'affinité de la RNA polymérase pour les sites promoteurs et localisés à l'extrémité gauche du DNA de T7; 2. L'alkylation du DNA crée de nouveaux sites de fixation non-spécifiques pour la RNA polymérase; 3. L'affinité de l'enzyme pour ses sites modifiés est plus grande que pour les sites promoteurs; 4. La fixation de l'enzyme aux sites non-spécifiques n'est pas inhibée aux concentrations élevées d'enzyme. L'alkylation du DNA en boule de verre peut affecter l'initiation des chaînes de RNA. En conclusion, nous avons proposé les indications dans la création des chaînes. Les modes d'enzyme fixés aux sites non-spécifiques bloqueraient l'action de la polymérase engagée dans la synthèse de RNA.

Contexte

Section :
Biologie cellulaire et moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire et moléculaire
host icon Hôte : Université d'Ottawa

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Titre du colloque :

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