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Évidence du rôle du calcium dans la sécrétion des minéralocorticoïdes par l'indicateur fluorescent QUIN 2

Mourad Benabderazzik
Nicole Gallo-Payet
Marcel Daniel Payet
France Bessette
MB

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Mourad Benabderazzik

Résumé du colloque

L'ACTH, la vasopressine et l'angiotensine II sont des régulateurs importants de la sécrétion des minéralocorticoïdes par le cortex surrénalien. L'importance du calcium dans la stimulation de la stéroïdogenèse par l'ACTH et l'angiotensine II est bien reconnue. L'activité mitotique induite par la vasopressine semble également impliquer le calcium. L'utilisation du nouveau marqueur QUIN 2 spécifique au Ca2+ nous permet de mettre en évidence le rôle de cet ion dans le processus de séquence stimulation - sécrétion. Des cellules isolées de cortex surrénalien préparées par dispersion à la collagénase suivant la méthode de Haning et al (1970) sont incubées avec du QUIN ester lipodissoluble (50 µM) à 37°C pendant 1 h. Cet ester est hydrolysé à l'intérieur de la cellule et devient un indicateur fluorescent permanent (QUIN 2) en sensible au calcium libre. Les mesures de fluorescence du QUIN 2 hydrolysé sont faites à 37°C dans un spectrophotomètre ZEISS ZFM4 utilisant une longueur d'onde d'excitation de 339 nm et d'émission de 492 nm. L'addition d'ACTH, vasopressine et angiotensine II induisent des augmentations transitoires significatives du taux de calcium intracellulaire libre. Les dosages de corticostérone et d'aldostérone sont faits en parallèle.

Contexte

Section :
Biophysique
news icon Thème du colloque :
Biophysique
host icon Hôte : Université du Québec à Chicoutimi

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Titre du colloque :

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