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Évidence pour une importante charge de surface affectant l'activité de la Na-K ATPase chez les ovocytes de Xenopus laevis

Hélène St-Jean
Houjin Huang
Michael Coady
Jean-Yves Lapointe
HS

Membre a labase

Hélène St-Jean

Résumé du colloque

La Na-K ATPase est une pompe membranaire qui transporte activement 3 ions Na+ contre 2 ions K+ et qui est responsable de l'établissement des gradients ioniques transmembranaires chez l'ensemble des cellules eucaryotes. L'activité de l'enzyme en fonction du potentiel membranaire (Vm) s'obtient directement de la mesure du courant sensible à la DHO, un bloqueur spécifique de la pompe, par la méthode de voltage imposé à deux microélectrodes appliquée aux ovocytes de Xenopus. Le courant de pompe (Ip) varie linéairement avec Vm de -150 à -25 mV, atteint un maximum (Ipmax) de 45±8 nA à +25 mV et initie une légère diminution à des potentiels encore plus positifs (conductance négative). Pour déterminer si un influx de Ca2+ dépendant du voltage pourrait être impliqué dans cette conductance négative, nous avons mesuré le courant Ip-Vm en présence de 0,5 mM La3+, un bloqueur des canaux Ca2+ présent chez les ovocytes. Le La3+ verrouille à 6% le complément modifié par actif: Ip est maximal à -25 mV et atteint à 23±3 nA alors que la conductance négative est diminuée. L'effet du La3+ pourrait résulter d'une diminution des conductances extracellulaires de Na+ et K+ de 65%. Cette observation est cohérente avec la présence d'une densité de surface de -127±4 mV, ce qui est confirmé par l'augmentation du potentiel d'inversion de courant additionné (10 mM Na+ externe) lorsque Ip-Vm est mesuré. Une expérience est nécessaire pour déterminer si cette charge de surface affecte la Na-K ATPase elle-même ou la membrane de l'ovocyte en général.

Contexte

Section :
Biophysique
news icon Thème du colloque :
Biophysique
host icon Hôte : Université de Montréal

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